人角膜內(nèi)皮細胞

產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品型號：

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問量：564

更新時間：2025-04-09

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產(chǎn)品名稱：人角膜內(nèi)皮細胞

組織來源：眼角膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞簡介：

人角膜內(nèi)皮分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細胞層。角膜的高度透明性和光學(xué)性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一，而角膜內(nèi)皮細胞（CEC）在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內(nèi)皮細胞是角膜內(nèi)層的單層細胞，構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障，通過離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分，維持角膜的半脫水狀態(tài)，保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nèi)皮細胞功能出現(xiàn)紊亂，常導(dǎo)致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細胞主要功能有：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能；②角膜內(nèi)皮細胞對角膜透明性有重要作用；③角膜內(nèi)皮細胞通過Na+-K+-ATP酶活性，維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度，防止水分滲入角膜內(nèi)，維持角膜實質(zhì)層相對脫水狀態(tài)，維持透明性。

方法簡介：

公司實驗室分離的人角膜內(nèi)皮采用混合膠原酶消化結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人角膜內(nèi)皮經(jīng)NSE（神經(jīng)元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠血栓前體蛋白   英文名稱：   Mouse Thrombus Precursor Protein   規(guī)格：      英文縮寫：   TpP

小鼠促甲狀腺素   英文名稱：   Mouse Thyroid Stimulating Hormone   規(guī)格：      英文縮寫：   TSH

小鼠甲狀腺素   英文名稱：   Mouse Thyroxine   規(guī)格：      英文縮寫：   T4

小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體   英文名稱：   Mouse TNF-related apoptosis inducing ligand   規(guī)格：      英文縮寫：   AIL

小鼠信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat hepatocyte growth factor (HGF) ELISA Kit 大鼠肝細胞生長因子(HGF)試劑盒

Humansphingomyelin,SMELISAKit 人鞘0脂(SM)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1試劑盒雞巨噬細胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞ANDROGEECEPTOR蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mousehiston-H2bELISAKit小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒規(guī)格：96T/48T

神經(jīng)細胞粘附分子2抗體

9號染色體開放閱讀框171抗體

ERAP2重組人 LRAP / ERAP2 蛋白 Protein

血紅素氧合酶1(HO1)重組蛋白 Recombinant Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

CD7 Protein Human 重組人 CD7 蛋白

GP120 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)

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ERAP2重組人 LRAP / ERAP2 蛋白 Protein

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HA重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

人角膜內(nèi)皮細胞大鼠信號素3A(SEMA3A)試劑盒 ，英文名： SEMA3A ELISA Kit

Pla calmodulin (CAM) ELISA Kit 植物鈣調(diào)素(CAM)試劑盒

Mouseoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanai-PL7-aibodyELISAKit人PL7抗體/抗蘇氨酰NA合成酶

細胞FGFR3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitGHR-Ab大鼠釋放激素受體抗體